Aide à Relancer L’erreur De Dépannage Emsa
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Parfois, votre méthode peut générer un message d’erreur suggérant un dépannage emsa. Il peut très bien y avoir de nombreuses raisons pour que cette erreur apparaisse.
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Avantages et inconvénients des données EMSA
L’analyse des changements de mobilité présente en fait un certain nombre d’avantages. La méthode essentielle est facile à utiliser et suffisamment robuste pour s’adapter à autant de conditions de connexion différentes (voir le tableau 2 destiné aux plages de spécifications). Lors de l’utilisation d’acides nucléiques radiomarqués, le test de base serait très sensible, permettant de tester de petites protéines et des acides gras nucléiques sains (concentration de 0,1 nM ou moins) et des échantillons de base de données de bonne taille (≥ 20 μl). Si une sensibilité aussi élevée n’est pas incroyablement nécessaire, des options de dosage avec des détecteurs fluorescents, chimioluminescents, en plus des détecteurs immunohistochimiques sont également disponibles13–17. Une large gamme de tailles d’acidité nucléique (longueurs d’oligonucléotides courtes jusqu’à plusieurs milliers de nucléotides/pn18,19) et de zones (acides gras nucléiques simple brin, duplex, triplex et quadruplex21, ainsi que petit ADN circulaire22) sont compatibles avec le test. Dans des conditions favorables, la répartition des protéines intégrales entre plusieurs substances nucléiques peut dans de nombreux cas être tracée à partir d’une seule clé 18, 23, comme d’ailleurs la réputation de complexes qui diffèrent souvent par la stœchiométrie des peptides sains et/ou la distribution des sites de liaison 4 pendant la journée et. Les protéines fonctionnant en taille à partir de minuscules oligopeptides lorsque vous avez besoin de transcrire des complexes avec Mr ≤ 106 peuvent bien conduire à des irrégularités de mobilité réussies 25, 26 et le test s’exécute bien avec des produits chimiques aminés hautement purifiés et des extraits de cellules brutes 27. Ces possibilités représentent la majorité. Comme vous pouvez le constater, ce test est toujours très populaire.
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DÉPANNAGE du test de mobilité du gel
Réponse concurrentielle non spécifiquePour bloquer la liaison non spécifique d’une protéine ou d’un extrait tout à fait analysé à ce fragment d’ADN ou oligonucléotide, un acide nucléique attirant l’attention non spécifique est ajouté à la réaction de capture. Si une séquence de stockage riche en GC est attendue, poly[d(i-c)] doit être utilisé ; Si une série de capture riche en AT est attendue, Poly [d(AT)] doit continuellement être utilisé comme concurrent non spécifique.
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