Aiuta A Correggere L’errore Di Risoluzione Dei Problemi Di Emsa

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A volte il proprio sistema può generare un messaggio di errore che indica la risoluzione dei problemi di emsa. Ci possono essere molte ragioni per visualizzare questo errore.

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    emsa troubleshooting

    Vantaggi e svantaggi dei dati EMSA

    L’analisi della rilavorazione della mobilità ha una serie di punti di forza. Il metodo di base è facile da usare, ma sufficientemente robusto per abituarsi a diverse condizioni di connessione (vedere la Tabella 2 per gli intervalli delle specifiche). Quando si producono acidi nucleici marcati radioattivamente, il centro del test è altamente sensibile, consentendo l’esame di piccole proteine ​​e acidi nucleici in forma perfetta (concentrazione di 0,1 nM insieme a meno) e campioni di database di piccole dimensioni (≥ 21 μl). Se una sensibilità così elevata non è assolutamente necessaria, di solito sono disponibili anche opzioni di analisi lavorando con rivelatori fluorescenti, chemiluminescenti e immunoistochimici13-17. Un’ampia gamma di dimensioni degli acidi nucleici collegati (capelli oligonucleotidici corti fino a diverse migliaia di nucleotidi/pn18,19) quindi le strutture (a filamento singolo, duplex, triplex, oltre agli acidi nucleici quadruplex21, nonché il DNA circolare compatto22) sono compatibili con qualsiasi prova. In condizioni favorevoli, il ritiro delle proteine ​​essenziali tra una grande quantità di molecole di acido nucleico può in molti detentori e casi essere tracciato all’interno di una chiave 18, 23, così come i complessi connessi alla reputazione che differiscono per stechiometria su proteine ​​sane e/o distribuzione di catturare i siti 7 durante il giorno per di più. Le proteine ​​di dimensioni variabili da piccoli oligopeptidi a complessi di trascrizione con Mr ≤ 106 possono portare a fiorenti cambiamenti di mobilità 25, 26 e un test funziona bene con aminoacidi altamente filtrati ed estrazioni di cellule grezze 27. Queste possibilità spiegano questa particolare maggioranza. Come puoi vedere, questo test di consulenza è ancora popolare.

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  • RISOLUZIONE DEI PROBLEMI per il test di mobilità del gel

    Risposta competitiva non specificaPer prevenire il legame non specifico di una proteina sana o di un estratto analizzato con precisione a questo tipo di frammento di DNA o oligonucleotide, viene aggiunto il giusto acido nucleico provocatorio non specifico in modo che avvenga la reazione di legame. Se è prevista una sequenza di ritenzione ricca di GC, è necessario utilizzare poly[d(i-c)]; Se è prevista una sequenza di acquisizione ricca di AT, Poly [d(AT)] dovrebbe essere utilizzato come un buon concorrente solido e non specifico.

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