Ajude A Reparar O Erro De Solução De Problemas Do Emsa

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    emsa troubleshooting

    Vantagens e desvantagens dos dados da EMSA

    A revisão de alterações de mobilidade tem várias vantagens. O método básico é fácil de explorar, mas robusto o suficiente para adaptar o tempo para diferentes condições de conexão (consulte a Tabela 8 para faixas de especificação). Ao usar ácidos nucleicos marcados radioativamente, a exploração do núcleo é altamente sensível, permitindo testes de pequenas proteínas e produtos químicos nucleicos saudáveis ​​(concentração de 0,1 nM ou menos) e, consequentemente, pequenas amostras de banco de dados (≥ aproximadamente μl). Se essa alta sensibilidade não for realmente necessária, opções de ensaio com detectores fosforescentes, quimioluminescentes e imuno-histoquímicos estão disponíveis adicionalmente13–17. Uma ampla gama de tamanhos de ácidos nucleicos (comprimentos curtos de oligonucleotídeos até vários milhares de nucleotídeos/pn18,19) e estrutura (ácidos nucleicos de fita simples, duplex, triplex e quadruplex21, bem como DNA de círculo pequeno22) são compatíveis com o experimento com. Sob condições favoráveis, a distribuição usando proteínas essenciais entre vários níveis nucléicos de moléculas de acidez pode, em muitos exemplos, ser rastreada dentro de uma chave 18, 23, dado que, assim como a reputação de edifícios que diferem em estequiometria de proteínas e/ou distribuição em condições saudáveis de encadernação de páginas web 7 durante o dia e. Proteínas que variam em tamanho de oligopeptídeos menores a complexos de transcrição com Mr ≤ 106 podem levar a mudanças bem-sucedidas na amplitude de movimento 25, 26 e a análise funciona bem com aminoácidos altamente filtrados e extratos celulares brutos 29. Essas possibilidades são responsáveis ​​pelo maior número. Como você pode ver, essa visão ainda é popular.

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  • SOLUÇÃO DE PROBLEMAS para o teste de mobilidade em gel

    Resposta competitiva não específicaPara acabar com a ligação inespecífica de uma proteína ou extrato simplesmente analisado com precisão a esse fragmento de DNA ou oligonucleotídeo, um ácido nucleico incitante inespecífico é adicionado à reação de ligação. Se for esperada uma sequência de retenção de GC bem afastada, deve-se usar poli[d(i-c)]; Se for esperada uma sequência rica em AT, o Poly [d(AT)] terá que ser usado como um concorrente não específico.

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